產(chǎn)品名稱：Cygnus E.coli大腸桿菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F410

產(chǎn)品規(guī)格：1 KIT

產(chǎn)品品牌：Cygnus

產(chǎn)品簡介：

Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒主要設(shè)計(jì)用于檢測產(chǎn)物重組表達(dá)過程中大腸桿菌宿主細(xì)胞污染，試劑盒使用的多克隆抗體對數(shù)百種HCPs具有反應(yīng)性。 Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒檢測低濃度可達(dá)到 0.2ng/mL

產(chǎn)品使用時一定要做好保護(hù)措施：0.5M硫磺酸有強(qiáng)腐蝕性，要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測前所有試劑都要平衡到室溫。

設(shè)計(jì)用于檢測產(chǎn)物重組表達(dá)過程中大腸桿菌宿主細(xì)胞污染，試劑盒使用的多克隆抗體對數(shù)百種HCPs具有反應(yīng)性。 Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒檢測低濃度可達(dá)到 0.2ng/mL。

ELISA檢測相比Western Blot：Western Blots檢測過程復(fù)雜并需借助程序分析結(jié)果。而且，Western Blot本質(zhì)上是定性分析，不能得到定量結(jié)果，檢測靈敏性也受到樣本體積的限制。Western Blot在下游純化過程中檢測產(chǎn)物HCPs缺乏靈敏度和特異性。而微量滴定板ELISA檢測可以克服上述限制。ELISA具備高度靈敏性，可獲得半定量結(jié) 果，是純化工藝，過程控制，常規(guī)質(zhì)量檢測的選擇。

組成成份：

● Anti- E. coli:HRP(辣根過氧化物酶記)?            1x12mL    F411(Product#)

● Anti- E. coli coated微量滴定板?                        12x8孔?   F412

● E. coli HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)     1mL/瓶?  F413

● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸)  ???           1x12mL?F006

● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨)?                          1x12mL?  F005

● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮)?                1x50mL    F004

檢測原理：

大腸桿菌E. coli檢測是一個雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的E. coli HCPs蛋白與標(biāo)記有抗-E. coli 抗體的辣根過氧化物酶同時反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-E. coli 蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反應(yīng)構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu)：固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物 反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度，水解物濃度與E. coli  HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出E. coli HCPs蛋白含量。

檢測過程： 

取出所有試劑平衡到室溫→分別移取25µl Cygnus F410 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)液，對照物和樣品至待測孔→移取100µl anti-E. coli:HRP(#F411)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育90分鐘，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350µl清洗緩沖液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100µl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)

結(jié)果分析：

Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 檢測結(jié)果數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線，例如點(diǎn)到點(diǎn)，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標(biāo)注吸光值，X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。（操作時每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要滴定到兩個小孔中，以便計(jì)算平均分光光度值，樣品也需計(jì)算平均吸光值）。

相關(guān)訂購信息：

品牌        貨號          名稱

Cygnus F500  Vero Cell HCP ELISA Kit Vero細(xì)胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 大腸桿菌宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F650 HEK 293 HCP ELISA Kit 人胚腎293細(xì)胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F140 Pichia pastoris HCP ELISA Kit 畢赤酵母菌宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F510 BHK HCP ELISA Kit 幼倉鼠腎細(xì)胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱：Cygnus E.coli大腸桿菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F410

關(guān)于公司：

Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品。共有39種Elisa 檢測試劑盒，包括原核、真核表達(dá)細(xì)胞宿主蛋白檢測試劑盒，細(xì)胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等

Cygnus公司產(chǎn)品涵蓋了E.Coli大腸桿菌宿主蛋白殘留、CHO細(xì)胞宿主蛋白殘留、HEK293細(xì)胞宿主蛋白殘留、Vero細(xì)胞宿主蛋白殘留以及細(xì)胞培養(yǎng)添加物如BSA殘留、Protein A殘留、insulin胰島素殘留等的檢測試劑盒。