產(chǎn)品名稱：BD stain buffer緩沖液 含BSA 500mL裝

產(chǎn)品貨號:  554657

英文名稱：Stain Buffer (BSA)

產(chǎn)品規(guī)格：500 mL

產(chǎn)品品牌：BD

產(chǎn)品簡介：

BSA可用于淋巴組織、骨髓、外周血或培養(yǎng)細胞制備的單細胞懸液的免疫熒光染色。藥物染色緩沖液(BSA)用于熒光試劑的稀釋和應用，以及用于流式細胞術分析(或熒光顯微鏡)的細胞的懸浮液、洗滌和存儲。根據(jù)前面對染色培養(yǎng)基的描述，我們將藥劑染色緩沖液(BSA)配制成中性pH (pH 7.4)緩沖鹽溶液(DPBS)，其中添加了0.2% (w/v)牛血清白蛋白(BSA)蛋白。因此，藥物染色緩沖液(BSA)旨在維持細胞活力，并最大限度地提高ph敏感熒光色素(如異硫氰酸熒光素(FITC))產(chǎn)生的熒光信號強度。藥物染色緩沖液(BSA)對于用生物素化的抗體和熒光標記的親和素對細胞進行染色是有用的，因為這種染色培養(yǎng)基不含生物素。當游離生物素出現(xiàn)在染色介質(zhì)中時，它可以干擾熒光親和素與生物素化抗體的結(jié)合，這些抗體與同源的細胞相關抗原結(jié)合。此外，游離生物素可以與細胞結(jié)合，并有助于增加暴露于熒光偶聯(lián)親和素的細胞的非特異性背景染色。藥物染色緩沖液(BSA)含有代謝抑制劑NaN3。NaN3抑制抗體交聯(lián)引起的細胞表面抗原的潛在再分配(例如，由于脫落或內(nèi)化)。因此，NaN3(與維持低溫環(huán)境溫度相結(jié)合)可以防止后續(xù)流式細胞分析(或熒光顯微鏡)中免疫熒光染色細胞產(chǎn)生的熒光信號強度的潛在損失。

產(chǎn)品應用:

流式細胞術(常規(guī)檢測)、熒光顯微鏡、細胞內(nèi)染色(流式細胞術)(發(fā)育期間檢測)

運輸與儲存：

保存在4°C未稀釋。

推薦的實驗流程：

使用Pharmingen染色緩沖液(BSA)對細胞進行直接免疫熒光染色的程序。

1. 使用標準方案從淋巴組織、骨髓、外周血或細胞培養(yǎng)中制備單細胞懸液。

2. 在冷的Pharmingen染色緩沖液(BSA)中清洗細胞兩次，并通過離心將細胞制成顆粒(例如，在4°C下300 x g)。Resuspend細胞用冷Pharmingen染色緩沖液(BSA)制成顆粒，最終濃度為2 × 10e7細胞/ml。

3.將50µl等量的細胞懸液(10e6細胞)分配到試管或微孔板的圓底孔中。

4. 在Pharmingen染色緩沖液(BSA)中稀釋熒光抗體至預定的最佳濃度，并添加少量的等量(例如，10µl)稀釋抗體到含有目標細胞懸液的試管或微孔。在冰上孵育20分鐘免受光。染色時間可能增加(≥45分鐘)取決于熒光抗體的熱情。

5. 用200µl(用于微孔板)或1ml(用于試管)的BSA清洗細胞兩次的抗體。每次離心后，小心地抽吸(對于微孔板或微孔管)或?qū)⒓毎w粒上清倒置并吸干(管)。

6. 將細胞顆粒重懸在200µl(用于微孔板)或0.5 ml(用于管)的Pharmingen染色緩沖液(BSA)中。轉(zhuǎn)移將細胞從微孔板上染色到適當?shù)脑嚬苤羞M行流式細胞分析(將最終體積調(diào)整到~0.5 ml)。

7. 染色后盡快(如≤4小時)用流式細胞術或熒光顯微鏡分析染色后的細胞樣本。如果必須延遲分析，然后染色細胞可以用緩沖多聚甲醛固定(例如，Cytofix Buffer和4°C保存(避光)。應盡快對固定的細胞進行分析(如染色和固定后一周)。

注1:Pharmingen染色緩沖液(BSA)同樣可以用于細胞的間接免疫熒光染色。在這種情況下，當使用未標記或生物素化一抗時，重復步驟4和步驟5。

注2:Pharmingen污點緩沖區(qū)(BSA)也可以用于immunofluorescent染色細胞表面抗原表達的注定要固定和immunofluorescently染色細胞因子等細胞內(nèi)抗原。在流式細胞術或熒光顯微鏡分析之前，可在Pharmingen染色緩沖液(BSA)中重懸和維持細胞內(nèi)細胞因子染色的細胞(例如，在4°C下，保護光線)

產(chǎn)品訂購信息：

貨號                       名稱                       規(guī)格

554657   BD   stain buffer 含BSA     500mL

產(chǎn)品名稱：BD stain buffer緩沖液 含BSA 500mL裝

產(chǎn)品貨號:  554657

關于公司：

BD 多色流式細胞術提供了各種目標細胞亞群的快速、多參數(shù)分析。其應用包括免疫學、免疫腫瘤學、病毒學、免疫監(jiān)測等。

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